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低速大容量离心机关于贴壁细胞传代步骤介绍:
①取适当75%酒精棉球擦拭超净作业台面→各种物品按次序摆放规整→点着酒精灯;
②培育箱中取出需要传代的细胞→吸管吸除培育瓶内旧培育液弃之;
③参加适当PBS清洗细胞两次;
④参加0.5~1ml胰酶后,置CO2培育箱中或室温25℃消化2~5分钟;
⑤肉眼见呈现针尖样发白空隙;或显微镜下调查,发现胞质回缩、细胞空隙增大;
⑥直接加少量含血清的培育液,停止消化;
⑦细胞脱离瓶壁后构成细胞悬液,按需求别离接种在新的培育瓶内;
⑧放回CO2培育箱持续培育。
低速大容量离心机关于悬浮细胞的传代步骤介绍:
①直接传代即让悬浮细胞渐渐沉积在瓶底后,将上清洗掉1/2 ~ 1/3,然后用吸管吹打构成细胞悬液后,再传代.
②运用低速冷冻离心机离心法:离心机转速设为800 ~ 1000rpm,离心5min,弃上清,加新的培育液,然后按一定份额传代接种。在挑选低速冷冻离心机转子时,一般装备5ml,10ml,15ml容量为主。另离心机在高速运转下会发生热量,有些细胞在遇热后会发生反响或许死邙,因此建议我们挑选低速带冷冻型离心机,假如细胞遇热不会发生反响,降低成本我们能够直接挑选低速离心